有研究采用体外实验对骆驼乳蛋白水解物(CMPH)的降压和抗炎活性进行了研究。对具有较强ACE抑制和抗炎活性的CMPH进行了肽段鉴定,并通过分子对接描述了它们与ACE可能的结合机制。SDS-PAGE图谱显示,木瓜蛋白酶产生的CMPHs比菠萝蛋白酶产生的CMPHs和碱性蛋白酶产生的CMPHs具有更高的蛋白质降解率。对木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶产生的水解物活性最高的CMPH,ACE抑制活性和抗炎活性显著增强。根据肽等级评分,在A9、B9和P9水解物中分别有20、3和43个肽被认为是潜在的生物活性肽,基于肽点-2模拟的结合研究表明,在A9水解物中的20个潜在生物活性肽中,只有1个(AEWLHDWKL)与ACE的三个催化位点有高结合。而在P9的43个活性多肽中,有14个与ACE催化位点有很强的结合力。进一步的分子结合机理研究表明,4个肽均能与ACE活性位点结合,具有良好的对接分数和MM-GBSA结合能。

图1 用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶水解的完整骆驼乳蛋白(CMP)及其水解产物(CMPHs)水解3、6和9h后,在12.5%分辨凝胶上的蛋白质图谱进行了分析

图2 (a)用圆圈突出显示血管紧张素转换酶(ACE)的活性部位,并仔细观察CLSPLQFR在ACE活性部位的相互作用

图3 血管紧张素转换酶-肽复合物与潜在生物活性肽相互作用的二维图(A)CLSPLQFR(B)CLSPLQMR(C)SHSPLAGFR(D)TLMPQWW骆驼乳仍然是中东国家主食的重要组成部分。尽管骆驼乳对健康有普遍的好处,但对骆驼乳健康潜力的调查仍然有限。在这项研究中,证明了骆驼乳蛋白是一种有趣的降压和抗炎多肽来源。还观察到酶水解释放出强效的降压肽和抗炎肽,酶的种类和水解时间对释放肽的生物活性有很大影响。碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶水解骆驼乳蛋白至6h可提高ACE抑制活性,而处理9h则降低该活性,证实了控制水解的重要性。此外,碱性蛋白酶产生的水解物比菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶产生的水解物具有更高的抗炎活性。本研究的重要发现是成功地鉴定了新的ACE抑制肽,并基于构效关系(SAR)和分子对接分析阐明了其抑制作用的机制。